用Pfu酶和Taq在相同条件下进行PCR,结果是Pfu酶能够扩增到目的条带,而Taq酶没有,是为什么呢?
问题描述：
用Pfu酶和Taq在相同条件下进行PCR,结果是Pfu酶能够扩增到目的条带,而Taq酶没有,是为什么呢?
提取出的DNA用TE溶解后加了RNase,但是RNase对PCR没有太大的影响啊
答
用的是两种酶 一个有一个没有不是很正常的么.要不然为啥是两种酶.因为后来决定做TA克隆，但是之前一直用的Pfu酶，后来Taq酶P不出来，用Pfu来作对照，发现Taq酶P出来，而且是Taq能P出来，Pfu酶P不出来，跟别人出现的情况差异太大了哪种酶能P出来对你的实验应该没有影响吧也许是那管在室温放的久了点 一般就是一种酶P不出来就换另一种试一下你是涂板之后菌P用Pfu没条带 还是TA克隆都是用PFU在做哦。。。我是在做TA克隆之前，P目的条带，因为Pfu酶P出来的没有加A，虽说有加A的方法，但是感觉效果不会很好，老师也要我尽量不要用太多的操作步骤。而且，关键是别人都是Taq酶能P出来，而Pfu酶P不出来，我的正好反了，貌似没人出现过这种情况，分析半天找不出原因P出来就可以了 何必纠结原因呢只要测序啥的对了 不就皆大欢喜了 在试剂都没有问题的情况下 这种事本来就找不到原因的 也许过几天你P又是不一样的结果