如果希望在哺乳动物细胞中表达X基因,表达载体的选择标准是什么?如何将表达的重组体转化入宿主细胞?如何检测是否转化?

问题描述:

如果希望在哺乳动物细胞中表达X基因,表达载体的选择标准是什么?如何将表达的重组体转化入宿主细胞?如何检测是否转化?

1 选择载体标准:采用能够在真哺乳动物细胞中能够正常转录的,由启动子、加PolyA 信号,转录终止和可能的内含子、增强子等组成的表达盒的载体,通常还有真核复制起始区,如SV40 ori.2 转染:化学法如磷酸钙共沉淀,脂质体...