求低温诱导染色体变化实验的详细过程!

实验材料
大蒜（2n=16）.之所以选用大蒜而非洋葱是因为在做观察有丝分裂实验时发现大蒜的效果比洋葱好.
实验步骤
1、洋葱长出约1cm左右的不定根时,放入冰箱的低温室内（4℃）,诱导培养36h.
2、剪取诱导处理的根尖约0.1cm,放入卡诺氏液（3份95%酒精与1份冰醋酸混合均匀）中浸泡0.1 小时,以固定细胞的形态,然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次.
3、制作装片：解离→漂洗→染色→制片（过程同观察细胞的有丝分裂的制片方法一样）
4、观察：用显微镜观察,并寻找发生了染色体数目变化的细胞.（视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.）
知识拓展
1、固定是借助于物理方法或化学药物的作用,迅速渗入组织和细胞将之杀死,使其形态结构和内含物尽可能保持生活时的完整和真实状态.
2、细胞中的染色体数目加倍,可以是增加一倍（变为32）,也可能是增加四倍（变为64）.
3、视野中大量细胞为有丝分裂间期的细胞,其特点为核膜、核仁明显,核质呈均匀状态.移动载玻片,先低倍镜后高倍镜,可观察到有丝分裂各个时期的细胞,尤其是中期的细胞,染色体的形态和数目清晰可见.
4、改良苯酚品红溶液和醋酸洋红溶液都可以使染色体着色
实验中几种溶液的作用
（1）卡诺氏液：固定细胞的形态.
（2）改良苯酚品红染液：细胞核染色,便于观察染色体的行为.
（3)15%的盐酸溶液：解离,使细胞分离开.
（4)95%的酒精溶液：洗去附着在根尖的卡诺氏液,在细胞的分离程度上起一定的作用.(参考资料：