荧光显微镜滤过波长和荧光染料发射波长的关系我的荧光显微镜G模块激发波范围是530-550,滤过范围是590,可以用来观察excitation 535 emisson 615的荧光染料么,是不是只要发射波长大于滤过范围就能观察到,影响信号强度么?写错 显微镜滤过范围是570nm
问题描述:
荧光显微镜滤过波长和荧光染料发射波长的关系
我的荧光显微镜G模块激发波范围是530-550,滤过范围是590,可以用来观察excitation 535 emisson 615的荧光染料么,是不是只要发射波长大于滤过范围就能观察到,影响信号强度么?
写错 显微镜滤过范围是570nm
答
1、你的荧光染料的激发波长(excitation)在显微镜的激发波范围内,激发没问题.
2、荧光染料的发射波长(emission)是有一定范围内的,比如550-650nm,称之为发射光谱.通常所说的发射波长615nm,一般指的是其发射光谱中强度最高的波长(最强发射波长).
3、显微镜的滤过波长范围是大于570nm,还是570nm及其左右多少nm范围?如果是大于570nm,那就没什么问题;如果是570nm及其左右多少nm范围,那就要看你的荧光染料的最强发射波长或其附近较强的发射波长是不是在显微镜滤过范围内,如果落在显微镜滤过范围内的发射波长的强度非常弱的话,则会严重影响观察,甚至可能无法观察到.
4、建议最好先确定显微镜的滤过波长到底是多少,察看一下荧光染料的发射光谱.