如何用TTC法测定细胞活力(具体步骤)?最近我在做植物细胞培养实验,要用TTC法测定植物悬浮细胞的生长活力,其具体操作步骤是什么呀?请大家帮帮忙!急!我现在做的是愈伤组织悬浮培养,要测定悬浮培养细胞的生长活力,具体操作步骤是什么呀?老大,你再帮帮忙吧!
问题描述:
如何用TTC法测定细胞活力(具体步骤)?
最近我在做植物细胞培养实验,要用TTC法测定植物悬浮细胞的生长活力,其具体操作步骤是什么呀?请大家帮帮忙!急!
我现在做的是愈伤组织悬浮培养,要测定悬浮培养细胞的生长活力,具体操作步骤是什么呀?老大,你再帮帮忙吧!
答
1.浸泡 将待测种子在 30 35 ℃温水中浸种(大麦、小麦 6 小时,玉米 5 小时左右),以增强种胚的呼吸作用.
2.显色 取吸胀的种子 200 粒,用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半,将其中的一半置于 2 只培养皿中,每皿 100 个半粒,加入适量的 0.5% TTC 溶液,以覆盖种子为度.然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h .观察结果,凡胚被染为红色的是活种子.
将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚,作同样染色处理,作为对照观察.
3.计算活种子的百分率