RNA分离操作注意事项书上说在核酸提取时可以用酚,但是酚会与水有一定比例的互溶,而水中残留的酚会对核酸的酶反应产生强的抑制,故要加氯仿求问:在提取RNA的时候不就是要抑制核酸的酶反应吗?为什么反而要把酚去掉
问题描述:
RNA分离操作注意事项
书上说在核酸提取时可以用酚,但是酚会与水有一定比例的互溶,而水中残留的酚会对核酸的酶反应产生强的抑制,故要加氯仿
求问:在提取RNA的时候不就是要抑制核酸的酶反应吗?为什么反而要把酚去掉
答
酚是致癌物质,自己配置酚类试剂对自己和实验室同事都不是什么好事。现在都有现成的试剂盒,为什么不用呢?建议购买试剂盒,在通风橱操作。
答
1.最后RNA是要沉淀下来的,不去也得去掉
2.酚会影响下一步反应,比如之后的逆转录
3.酚有毒,去掉也好