目的基因与PET-28a连接后 如何算表达的蛋白的大小
问题描述:
目的基因与PET-28a连接后 如何算表达的蛋白的大小
目的基因大小为1443bp 有终止密码子子无起始密码子,用的是EcoR1和Sal1的酶切位点,原核表达出来的蛋白有多大?
答
你的目的片段没有起始密码子,显然要利用pET-28a的ATG密码子,因此表达的外源蛋白将融合进一段pET-28a序列所编码的肽段,这段肽段为36肽:MetGlySerSerHisHisHisHisHisHisSerSerGlyLeuValProArgGlySerHisMetAlaSerMetThrGlyGlyGlnGlnMetGlyArgGlySer(GluPhe)【其中括号内两个氨基酸为EcoRI识别序列所编码】,表达蛋白的其它氨基酸残基则由你的外源片段上EcoRI识别位点后至终止密码子之间的碱基所编码,这样你表达的外源蛋白的一级序列就出来了,那么算分子量就是全部氨基酸残基的分子量之和了.