高效液相色谱测定时标准品不出峰是怎么回事HPLC测定槲皮素和山奈酚时,按照文献将色谱条件设定为检测波长360nm,柱温30度,流速1ml/min,流动相是甲醇-0.2%磷酸溶液（45：55）.标准品用液相色谱甲醇超声溶解定容,微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪,但是就是看不见峰.文献上槲皮素在该条件下是10.3mim出峰,山奈酚在系统条件下13.67min出峰.我把测定时间设定为30min,但在30min中内没有任何峰出现,进了几针,都是这样,请教大侠帮我分析一下,这是怎么回事?
问题描述：
高效液相色谱测定时标准品不出峰是怎么回事
HPLC测定槲皮素和山奈酚时,按照文献将色谱条件设定为检测波长360nm,柱温30度,流速1ml/min,流动相是甲醇-0.2%磷酸溶液（45：55）.标准品用液相色谱甲醇超声溶解定容,微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪,但是就是看不见峰.文献上槲皮素在该条件下是10.3mim出峰,山奈酚在系统条件下13.67min出峰.我把测定时间设定为30min,但在30min中内没有任何峰出现,进了几针,都是这样,请教大侠帮我分析一下,这是怎么回事?
答
不同的色谱柱,保留差异会很大,这点你一定要记住.
建议是：将甲醇的比例增大,比如70：30,再根据主峰的保留时间调整比例,直到分离结果满意.