请问western blot点样第一次做垂直式蛋白质电泳,在点样孔里点样,枪放在两玻璃板之间,向点样孔点样时为什么有时蛋白样流到旁边的点样孔,有时还漏到玻璃板后面?哪里出错了?写错了,是枪头放在两玻璃板之间。
问题描述:
请问western blot点样
第一次做垂直式蛋白质电泳,在点样孔里点样,枪放在两玻璃板之间,向点样孔点样时为什么有时蛋白样流到旁边的点样孔,有时还漏到玻璃板后面?哪里出错了?
写错了,是枪头放在两玻璃板之间。
答
我觉得不是胶的问题,点样孔有问题应该很快能看的出来。是不是移液枪用力太大啊?操作的问题。要不就是样品太多,换大孔的胶试试。
答
loading buffer 可能浓度不够,所以会漂的比较厉害。漏到玻璃后面的话就是胶做的不好,胶和板之间有空隙了。
答
一般应该不会出现这种情况啊,我也是才开始做,从没有遇到这种情况.我个人感觉可能有以下几点您需要检查一下:1.制胶有没有问题?浓缩胶制的时候要求加了TEMED之后要尽快加入制胶板中,而且下层分离胶之上应该有其他溶液...
答
你的枪头没有插到梳子孔里吧。