DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是?6*的一定要稀释成1*的使用吗?

问题描述:

DNA琼脂糖凝胶电泳的loading buffer作用是?
6*的一定要稀释成1*的使用吗?

主要成分是:溴酚蓝和甘油,有些还含有EDTA和Tris-Hcl.
作用是增加DNA的比重,方便上样(比重比电泳缓冲液大更容易沉在上样孔)。
不一定要稀释,但是如果含有EDTA和Tris-Hcl的loading buffer最好稀释,要不然盐浓度太高会让溴酚蓝形状跑得很怪,一定情况下还会影响DNA条带。

1.为了和DNA混合起来沉降下来,这样DNA就不会飘出来了(里面有蔗糖)
2.溴酚蓝可以提示DNA走的位置
3.一定要稀释成1倍,否则就浓度就不对了,但也不用太精确,大概就可以了

作用:使DNA粘度增大,不要再点样中被漂离凝胶; 加入的指示剂 可指示前沿.
1*的浓度 是个经验.浓度太大,可能产生 DNA和buffer中物质难以分开,拖带;指示剂前沿太宽等 适当增加浓度 没问题,但没必要.