做western样品处理问题如果我要把单抗转到NC膜上进行一抗二抗反应,那应该怎么处理,上电泳前一煮不就失活了吗,请说明一下理由比如我要测一个单抗，把它转膜上，然后加抗原，再加二抗，这样可行吗，那转膜上的单抗怎么处理，如果是细胞表面分泌的蛋白呢，
问题描述：
做western样品处理问题
如果我要把单抗转到NC膜上进行一抗二抗反应,那应该怎么处理,上电泳前一煮不就失活了吗,请说明一下理由
比如我要测一个单抗，把它转膜上，然后加抗原，再加二抗，这样可行吗，那转膜上的单抗怎么处理，
如果是细胞表面分泌的蛋白呢，
答
转膜并不是把单抗转上去,而是把总蛋白给转到膜上,便于后面一抗二抗反应.电泳前煮蛋白样品是让蛋白变性,由空间折叠构象变成线性的结构,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳后,能按照分子量大小依次排开.抗原抗体反应并不需要有活...