SDS-PAGE电泳跑不出条带现在在做SDS-PAGE电泳,用考马斯亮蓝R250染色,染色后就能看到条带吗?如果看不到是什么原因造成的?现在还有一个问题,就是在电泳快结束的时候,蛋白的条带会变黄,连缓冲液也会有黄色的杂质。而且,再脱完色后,在胶的底部会有近1cm的白色带,这是为什么?
问题描述:
SDS-PAGE电泳跑不出条带
现在在做SDS-PAGE电泳,用考马斯亮蓝R250染色,染色后就能看到条带吗?如果看不到是什么原因造成的?
现在还有一个问题,就是在电泳快结束的时候,蛋白的条带会变黄,连缓冲液也会有黄色的杂质。而且,再脱完色后,在胶的底部会有近1cm的白色带,这是为什么?
答
可能还不熟练,你多练习几次,一个月后如果还没有条带,就先放一放,过段时间再试一下肯定有了,这就是实验经验。不知道什么原因。
答
蛋白浓度不够; 跑胶的时间过长或过短; 仪器问题; 正负极不要插反;
能想到的就这些了..
答
染色后,当然还需要脱色液(有乙醇、醋酸)脱色,不脱色的话全是蓝色,不能区分条带.脱色后,条带才能显示出来.
在跑SDS-PAGE时,需要点Marker,正常情况在染色、脱色后能至少看到Marker的条带.如果Marker都没有,那就是电泳问题了.