最早采用稀释法分离微生物的是谁

稀释法要算李斯特,纯种分离技术要算科赫
要从含有成亿个细胞,成百个种类微生物的样品中分离出某种微生物,并不是容易的事.第一个成功地分离出纯种细菌的,是前面提到过的在手术中采用消毒剂的医生李斯特.关键在于他发明了一种可以取出数量可以小到0.00062毫升牛奶的微量注射器.因为这样才可能使样品中的微生物尽可能少.他用不含任何微生物的灭过菌的水稀释极少量的牛奶,再把稀释的牛奶分装在几个灭过菌的酒杯中,成功地分离出现在还在制造酸奶中采用的乳酸链球菌.这种方法经过100多年的改进,现在仍然是一种分离纯种微生物的常用方法,叫做系列稀释法.
李斯特的方法毕竟太麻烦了.比李斯特早几年,有位科学家把要分离的样品用灭菌后的水稀释后放在煮熟的马铃薯片上,在温暖的地方培养几天后,马铃薯上长出星星点点的五颜六色的菌落.当时这位科学家认为至少有一部分菌落是由一个细胞繁殖形成的,如果重复几次,就可以分离到纯培养物.不过,真正解决问题的纯种分离方法,是著名的德国医生,伟大的微生物学奠基人之一科赫和他的研究小组建立起来的.科赫在明胶中加上一些营养物质（例如肉质）,加热融化后倒在一片灭过菌的玻璃片上,待其凝固后,用在火焰上烧红过,因而烧死了全部原来附着的微生物的白金丝蘸上一点要分离的样品（因为白金丝烧红后很快便会冷却,立即用来蘸样品时也不会烧死样品中我们需要分离的微生物.现在我们用电炉丝代替,价格便宜多了,这就是我们今天常见的接种针）,在凝固的明胶上轻轻划动,使样品中的很少量微生物沾在明胶上,然后用玻璃罩盖上玻璃片,以防空气中的杂菌落下污染.几天后,明胶板上便长出一个个彼此分开的菌落.这种方法叫做划线分离法.
德国科学家科赫(Koch)建立了单种微生物分离和纯培养技术,利用这些技术研究炭疽病时,发现动物的传染病是由特定的细菌引起的.从而得知,微生物也和高等植物一样,可以根据它们的种属关系明确地加以区分,从此以后,各种微生物纯培养技术获得成功.单种微生物分离和纯培养技术的建立,是食品发酵与酿造技术发展的一个转折点.