PCR扩增gc含量很高的序列
问题描述：
PCR扩增gc含量很高的序列
我要克隆一个gc含量很高（75％）的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高（大于80％）,但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终止子上.
请问对于设计引物和pcr扩增有什么好的建议.
答
没事,照常扩吧
gc buffer ,然后可以引物退火温度高一些,60以上.采用2步法试试