培养基和培养皿的灭菌方法为什么不一样

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• 函数z=z(x,y)由方程e^z-xyz=0确定,求偏导时不同方法不同答案函数z=z(x,y)由方程e^z-xyz=0确定,求∂^2z/(∂x∂y)用不同的方法解出了不同的答案.方法一：对等式两边分别求x,y的偏导算出∂z/∂x和∂z/∂y,再对∂z/∂x求对y的偏导方法二：对等式两边分别求x,y的偏导算出∂z/∂x和∂z/∂y,再对任意一个求过偏导的等式（如求过x的偏导的等式）再次在两边求另一个的偏导（与x对应的y的偏导）,从而算出∂^2z/(∂x∂y)然而事实证明这两种方法算出来的答案是不一样的,而且第二种是错的.请问这是为什么?（如果说是求∂^2z/(∂x^2)的话貌似就没有这样的问题,因为书上也是用第二种方法做的）
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• 有关两种刚果红染色法的问题（请您认真看完我的问题）老师请看高中选修一生物教材专题二课题三,方法一也就是先培养微生物再加入刚果红,并未明确指出对刚果红溶液进行灭菌,而方法二也就是再倒入平板时就加入刚果红,已明确指出对刚果红溶液进行灭菌,但为什么方法二却容易有杂菌影响（比如产生淀粉酶的微生物和具有降解色素能力的微生物）而方法一却不容易呢?请老师认真回答我的问题,务必确保您的答案正确,谢谢
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