细菌培养的过程,从冷冻的菌 到摇瓶实验
问题描述:
细菌培养的过程,从冷冻的菌 到摇瓶实验
答
复苏 平板划线培养 挑单菌落 中试管扩增 摇瓶扩增
1.复苏:根据所培养的细菌选择适宜的培养基,大部分细菌在LB培养基中在超净工作台先用1毫升左右的适宜的培养基溶解冷冻菌,然后转移到10毫升中试管(放入4毫升液体培养基)中,一般在37摄氏度摇床静止或低转速培养12小时或者过夜(温度取决于所培养的细菌适宜生长的温度).
2.平板划线培养:在平板(琼脂+液体培养基)划线,放37摄氏度培养箱培养箱中倒置培养6小时~12小时,在平板上观察是否形成了单菌落.
3.挑单菌落:在超净台中挑选典型单菌落,置入10毫升中试管(内有5毫升液体培养基)中,在37摄氏度摇床,转速200转培养12小时或者过夜,肉眼能看到试管浑浊.
3.按照1:20的比例将中试管中的菌液移到250毫升三角瓶(放入100毫升液体培养基),培养条件同前.注意:所有的接种操作均需要在层流罩中,培养基应无菌.