碘量法测定葡萄糖含量实验步骤
碘量法测定葡萄糖含量实验步骤
碘有氧化性,葡萄糖有还原性,二者可发生反应,淀粉遇碘变成蓝色,可用淀粉做指示剂.
1. 1%淀粉溶液的配制
称取1g可溶性淀粉,倒入小烧杯中,先加入10mL蒸馏水调匀,然后加90mL蒸馏水煮沸,边煮边搅,使其呈透明状为止,冷却后转入100mL容量瓶中,定容,备用.
2. 碘溶液的配制
称取2g碘化钾倒入小烧杯中,加入少量蒸馏水使碘化钾溶解,再称取1.3克碘,加入烧杯中使其完全溶解,再转入1000mL容量瓶中用蒸馏水溶解并定容至刻度,(因碘在蒸馏水中的溶解度较小,加碘化钾的作用是为了增大碘在蒸馏水中的溶解度)避光保存,备用.
3. 碘溶液的标定
准确移取10mL 1mg/mL的葡萄糖溶液于锥形瓶中,加入20mL蒸馏水和1mL 1%的淀粉溶液,再用碘溶液滴定,当锥形瓶中的溶液出现棕红色时,已接近氧化还原反应的终点,此时,要放慢滴定的速度,滴至微蓝色并在30s内不褪色即为滴定终点.滴定五次,记录体积V1,取平均值.
取30mL蒸馏水和1mL1%淀粉溶液于锥形瓶中,用碘溶液滴定做空白实验,滴定五次,记录体积V2,计算空白值,从平均值中扣除空白值即为标定葡萄糖溶液所消耗的碘溶液的体积V12.
4. 标准曲线的绘制
分别准确吸取葡萄糖标准溶液(1mg/mL)5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100mL,稀释至100mL. 各取10mL,加入20mL 蒸馏水和1mL 1%淀粉溶液,用已标定的I2溶液进行滴定,记录所消耗的碘溶液的体积,滴定五次,取平均值,并扣除空白值.根据葡萄糖标准溶液浓度与所消耗的碘溶液的体积进行线性回归,得出回归方程.
5. 待测溶液中葡萄糖的滴定
用移液管移取10mL待测溶液,加入20mL蒸馏水和1mL 1%淀粉溶液,用已标定的I碘溶液进
行滴定,记录所消耗的碘溶液的体积.滴定五次取平均值,并扣除空白值得到 V样 .
将V样带入回归方程 即可得出待测溶液中葡萄糖的浓度.