紫外吸收法测定蛋白质含量时含有核酸类杂质应怎样校正?
问题描述：
紫外吸收法测定蛋白质含量时含有核酸类杂质应怎样校正?
答
因为核酸在260nm处的光吸收比280nm更强,但蛋白质却恰恰相反,因此可利用280nm及260nm的吸收差来计算蛋白质的含量.
常用下列经验公式计算：
蛋白质浓度（mg/mL）=1.45A280-0.74A260
(A280和A260分别为蛋白质溶液在280nm和260nm处测得的吸光度值)
还可以通过下述经验公式直接计算出溶液中的蛋白质的含量：
蛋白质浓度（mg/mL）=F*A280*D*1/d