如果只有得到的样品中DNA的量很少(DNA是100bp的）,拿去测序会有结果吗?
问题描述：
如果只有得到的样品中DNA的量很少(DNA是100bp的）,拿去测序会有结果吗?
HPLC能探测到量很少的DNA吗?DNA有带荧光标记.
经HPLC纯化后直接拿去测序可以吗?
要测序的话至少要多少的量呢?
引物序列我知道~
怎么样连到载体上去呢？HPLC纯化后要先PCR在连吗？是不是要做个克隆了？
如果量不够的话，HPLC后PCR下，拿PCR的产物测序可以吗？
再谢再谢！
答
100bp的片段去直接测序很困难.并且你有该片段两侧的引物序列么?
建议你还是做一步简单的连接反应将该片段链接到载体上去测序,这样比较保险些.
测序时DNA在溶液中的浓度最好大于100ng/微升.如果提供10微升样品测序的话,也就是需要1微克的DNA.
是要做个克隆.