在做聚丙烯酰胺凝胶电泳时为什么分离胶可以凝固,但浓缩胶很长时间都凝固不了

问题描述:

在做聚丙烯酰胺凝胶电泳时为什么分离胶可以凝固,但浓缩胶很长时间都凝固不了

分离胶一般40来分钟凝好,浓缩胶一般要90分钟 想快一些你可以在旁边放个电炉提高温度,或多加适量的催化剂。

需要催化剂。

主要可能是TEMED和AP的量的问题,你可以参考一下我的配方:
分离胶12.5%(SDS),10ml体系
分离缓冲:2.5ml
贮胶:4.167ml
纯水:3.233ml
10%SDS:0.1ml
10%AP:100微升
TEMED:5微升
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浓缩胶5%,4ml体系
浓缩缓冲:1ml
贮胶:0.6ml
纯水:2.35ml
10%AP:45微升
TEMED:15微升
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以上配方经本人亲用无数次证明切实有效,大概在一小时左右即可凝固,天冷凝得慢可放置于25度烘箱内帮助加速凝固.